民俗常识 | 2024年05月09日 12:06:31 | 阅读:2320
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1、作为一种分子标记(Marker),构建分子图谱。分子标记克隆在质粒上,可以繁殖及保存。DNAMarker是分子量不同的DNA片段,主要用途就是DNA分子凝胶电泳时,加样用做对比来检测琼脂糖凝胶是否有问题。现在常用的DNAMARKER有两种,一种是病毒等DNA经过酶切获得的,分子量大小有零有整,另外一种是固定数值的,比如100BP,200BP等。两种MARKER都不难 *** ,对于之一种,稍微难一些,主要是要获得病毒等大的基因组片段,然后用适当的酶切,切割完全以后,就能得到相应的图谱。
2、第二中实际上很简单,如果你手头有任何一个载体,而且它的序列完全清楚,那么可以采用PCR的 *** 获得一系列大小不同的片段,比如上游引物可以使用一个,然后用数数的 *** 确定下游100BP处的下游引物,扩增出的就是100BP的片段,200BP处的引物就是200BP的片段,依此类推,可以获得一系列不同大小的片段,扩增后,把它们放到一起,就获得了自制的MARKER了
一般在电泳的时候都会有marker的,就是对照,根据对照片段就知道你要分析的片段的长短了。
常用的DNA电泳marker:DL2000plus的条带大小依次为5000、3000、2000、1000、750、500、250、100bp共8条带.DL2000的就是少了5000的那条,一共7条带.如果要是D1000的话,就是1000、700、500、400、300、200、100bp共6条,常用的就这些了.
常用的蛋白电泳marker:蛋白预染marker大小依次为170、130、95、72、55、43、34、26、17、10KDa,其中72是红色的那条,10是绿色的那条,共10条带.其他的也是视情况而定.
1、在PCR实验中,选择marker需要考虑多个因素,包括PCR产物大小、电泳条件、检测灵敏度等。常用的marker有DNA分子量标准品、DNA序列标记物和RNA标记物等。
2、DNA分子量标准品适用于测量PCR产物大小,DNA序列标记物适用于检测PCR产物的存在与否,RNA标记物适用于检测RNA转录产物。在选择marker时,需要根据实验需求和条件进行综合考虑,选择最适合的marker。
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